人血清分离后的蛋白质样本在-80℃冰箱中,通常可稳定存放6个月至2年,具体时长受样本处理、分装方式、密封情况及初始纯度影响。
影响存放时间的关键因素如下:
• 初始处理:血清分离后需及时离心去除细胞碎片,若延迟低温处理,蛋白质可能提前降解。
• 分装方式:建议小体积(如0.5-1mL)分装,避免反复冻融(每次冻融会破坏10%-20%的蛋白质结构)。
• 密封情况:需使用密封性良好的冻存管,防止冰箱内水汽进入或样本挥发,导致蛋白质浓度改变。
• 样本纯度:若血清中含有蛋白酶、微生物或杂质,会加速蛋白质降解,需提前纯化或添加蛋白酶抑制剂。
关键操作建议:
1. 血清分离后1小时内完成分装并放入-80℃冰箱。
2. 每次取用后立即放回冰箱,避免在室温下放置超过10分钟。
3. 若需长期存放(超过2年),建议结合真空冷冻干燥处理,可延长至5年以上。